¿Quién shishi PATENTA un bichito? Sólo quien tiene intención de utilizarlo








Bill Gates predijo una esa época en el 2020 de la que yo le hablo en 2015.

 
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Faltan aliens

Más esclavos de lo que somos ahora los que trabajamos en la empresa privada no se puede ser.

Muy peliculero todo.

Hace mucho que no te asomas a la ventana ¿eh?

Si te hubieran dicho hace dos meses que no ibas a poder caminar por la calle, que no podrías juntarte con tus amigos, que te podrías perder tu trabajo y que no podrías ni ver a tu familia...
¿No te hubiera parecido ENTONCES también "muy peliculero"?

Bueno, pues eso pasó. Yo abrí un hilo sobre esto ANTES de que pasara.
(Hilo de Febrero)
¿Estáis ya preparados para la supresión TOTAL de los derechos fundamentales?

Peliculero...ojitos: Claro que sí, wapi.
 
Hace mucho que no te asomas a la ventana ¿eh?

Si te hubieran dicho hace dos meses que no ibas a poder caminar por la calle, que no podrías juntarte con tus amigos, que te podrías perder tu trabajo y que no podrías ni ver a tu familia...
¿No te hubiera parecido ENTONCES también "muy peliculero"?

Bueno, pues eso pasó. Yo abrí un hilo sobre esto ANTES de que pasara.
(Hilo de Febrero)
¿Estáis ya preparados para la supresión TOTAL de los derechos fundamentales?

Peliculero...ojitos: Claro que sí, wapi.
Somos muchos , ya nos tienen esclavizados , se sabe claramente quienes son los poderosos. Antes o después alguien los matará a ellos y sus familias.

Dijiste lo del bichito el 26 de febrero, menos los políticos españoles todo el mundo sabía lo del bichito.

Incluso un empresario sin escrúpulos compró mascaras para especular con ellas cuando se dedicaba a la alimentación.
 
....Antes o después alguien los matará a ellos y sus familias.

....
Nadie sabe quienes son, mencionar a los rostchilds, rockefeller etc es tonteria..esos son muy conocidos, esos representan a la elite de verdad, estos que he nombrado no son mas que hombres de paja sin ningun poder real...Y por cierto eso de matarlos, me gustaria saber como lo harias, como que lo veo dificil eh? si nadie sabe donde viven realmente...
 
O he leído mal, o esta patente es para elaborar un test de detección de cobi19, lo cual en su día era útil para el SARS y ahora también para el cobi19.
No os paséis de conspiranoicos, no hagáis caso a José Luis de Mundo Desconocido, al menos en esto...
Nadie pone algo así en una patente pública.
 
Evento 201 - Simulacro de esa época en el 2020 de la que yo le hablo.








 
18 de octubre de 2019 Evento 201 (Simulacro de esa época en el 2020 de la que yo le hablo Global con cobi19 donde morían 65 millones de personas).
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15 líderes mundiales de negocios, gobierno y salud pública participaron del simulacro desarrollado en Nueva York.
Quienes hicieron el mapa de Johns Hopkins ya habían hecho un simulacro en octubre pasado - Infobae

Quienes hicieron el mapa de Johns Hopkins ya habían hecho un simulacro en octubre pasado
En Nueva York se realizó un ejercicio sobre los riesgos y efectos de un eventual brote global. Los organismos y actores que formaron parte del evento advirtieron que la próxima esa época en el 2020 de la que yo le hablo causaría grandes enfermedades, muertes, “y podría desencadenar importantes consecuencias económicas y sociales” a nivel mundial.
16 de marzo de 2020

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El "Event 201" evaluó los riesgos y efectos de una eventual esa época en el 2020 de la que yo le hablo grave.

El 18 de octubre de 2019, el Centro Johns Hopkins para la Seguridad de la Salud, en asociación con el Foro Económico Mundial y la Fundación Bill y Melinda Gates, llevó a cabo en Nueva York el “Evento 201”.

Este evento, del que además participaron líderes mundiales de negocios, gobierno y salud pública, consistió en un simulacro pandémico de alto nivel en el que fueron expuestas las áreas en las que serían necesarias “alianzas público/privadas” para hacer frente a una eventual esa época en el 2020 de la que yo le hablo de cobi19 y disminuir las consecuencias económicas y sociales a gran escala. “El ejercicio sirvió para resaltar los desafíos de preparación y respuesta que probablemente surgirían en una esa época en el 2020 de la que yo le hablo muy severa”.

“En los últimos años, el mundo ha visto un creciente número de sucesos epidémicos, que asciende a aproximadamente a 200 anualmente. Estos acontecimientos están aumentando y son perjudiciales para la salud, las economías y la sociedad”, señalaron los diferentes organismos que formaron parte del evento.

Las partes coincidieron en que la gestión de ese tipo de sucesos “agota la capacidad global, incluso en ausencia de una amenaza de esa época en el 2020 de la que yo le hablo” y lanzaron una advertencia: “Los expertos coinciden en que es solo cuestión de tiempo antes de que una de estas epidemias se vuelva global, una esa época en el 2020 de la que yo le hablo con consecuencias potencialmente catastróficas”.


Bill Gates predijo una esa época en el 2020 de la que yo le hablo en 2015.

El Centro Johns Hopkins, el Foro Económico Mundial y la Fundación Bill y Melinda Gates sostuvieron que una eventual esa época en el 2020 de la que yo le hablo “requeriría una cooperación confiable entre varias industrias, gobiernos nacionales e instituciones internacionales clave”. Además, expusieron que recientes estudios económicos revelaron que “las pandemias serán la causa de una pérdida económica anual promedio del 0.7% del PIB mundial, o 570 mil millones de dólares”.

“La próxima esa época en el 2020 de la que yo le hablo grave no solo causará grandes enfermedades y pérdida de vidas, sino que también podría desencadenar importantes consecuencias económicas y sociales en cascada que podrían contribuir en gran medida al impacto y el sufrimiento global”, alertaron.

Cómo fue la simulación.

El “Evento 201” simuló un brote de un nuevo cobi19 transmitido de murciélagos a cerdos, y de éstos a personas, que eventualmente se vuelve eficientemente transmisible de persona a persona, lo que deriva en una esa época en el 2020 de la que yo le hablo severa. “El patógeno y la enfermedad que causa se basan en gran medida en el SARS, pero es más transmisible en la comunidad por personas con síntomas leves”.

La enfermedad simulada “comienza en granjas porcinas en Brasil, de manera silenciosa y lenta al principio, pero luego comienza a propagarse más rápidamente en entornos de atención médica”. “Cuando comienza a extenderse eficientemente de persona a persona en los barrios de bajos ingresos y densamente poblados de algunas de las megaciudades de América del Sur, la epidemia explota. Primero se exporta por transporte aéreo a Portugal, Estados Unidos y China, y luego a muchos otros países. Aunque al principio algunos países pueden controlarlo, continúa extendiéndose y reintroduciéndose, y eventualmente ningún país puede mantener el control”.

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Mapa Global de Casos de cobi19-2-3-4

El mapa interactivo que desarrolló la Universidad Johns Hopkins para seguir minuto a minuto el avance del cobi19 en todo el mundo.

Como resultado del ejercicio, los especialistas reconocieron que no habría posibilidad de desarrollar una banderilla en el primer año. Sí hicieron referencia a un “antiviral ficticio” que podría servir como una especie de tratamiento para los enfermos, pero no limitar la propagación del bichito.

“Como toda la población humana es susceptible, durante los primeros meses de la esa época en el 2020 de la que yo le hablo, el número acumulado de casos aumenta exponencialmente, duplicándose cada semana. Y a medida que se acumulan los casos y las muertes, las consecuencias económicas y sociales se vuelven cada vez más graves”, explicaron tras el simulacro.

El ejercicio arrojó que la esa época en el 2020 de la que yo le hablo de cobi19 ficticia comenzó a disminuir tras 18 meses. No obstante, ésta continuaría “hasta que haya una banderilla efectiva o hasta que el 80-90% de la población mundial haya estado expuesta”. “A partir de ese momento, es probable que sea una enfermedad infantil endémica”, concluyeron.

Quienes hicieron el mapa de Johns Hopkins ya habían hecho un simulacro en octubre pasado
En Nueva York se realizó un ejercicio sobre los riesgos y efectos de un eventual brote global. Los organismos y actores que formaron parte del evento advirtieron que la próxima esa época en el 2020 de la que yo le hablo causaría grandes enfermedades, muertes, “y podría desencadenar importantes consecuencias económicas y sociales” a nivel mundial.

Ya se reportaron más de siete mil muertos por el cobi19 (REUTERS/Christian Hartmann)

El pasado mes de enero, apenas unos meses después del simulacro realizado en Nueva York, la Universidad Johns Hopkins desarrolló un mapa interactivo para seguir minuto a minuto el avance del el bichito-19 en China y el resto del mundial. El mapa permite ver el crecimiento en el número de infectados, muertos y recuperados en los distintos rincones del planeta.

De acuerdo a sus datos, a nivel global se registran más de 181.000 casos de el bichito-19, siendo China (81.032), Italia (27.980) e Irán (14.991) los más afectados. La cifra de muertos, en tanto, asciende a 7.116, mientras que más de 78.000 personas lograron recuperarse.

La rápida propagación que ha tenido el brote llevó a las autoridades de todo el mundo a extremar las medidas para evitar que continúen en ascenso los casos de contagio. Además, la comunidad internacional también está trabajando para reducir los efectos que tendrá la propagación del bichito sobre la economía mundial.
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Libro Los Amos del Mundo están al acecho.
La Táctica de las Pandemias (Pag 205).
Una esa época en el 2020 de la que yo le hablo global (Pag 208).
Los amos del mundo.
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Evento 201 (Simulacro de esa época en el 2020 de la que yo le hablo de cobi19 que mata 65 millones de Personas).

Del simulacro de Nueva York a la esa época en el 2020 de la que yo le hablo de cobi19, pasando por la predicción de Bill Gates
Una esa época en el 2020 de la que yo le hablo ficticia del cobi19 simulada hace tres meses por expertos ha dado de baja de la suscripción de la vita a 65 millones de personas. - Le blog de Contra información
Simulación sobre esa época en el 2020 de la que yo le hablo de cobi19 hace 3 meses mostró que podría dar de baja de la suscripción de la vida a 65 millones de personas [EN].
La fundación de Bill Gates participó en un simulacro de esa época en el 2020 de la que yo le hablo, pero con síntomas comunes a varias cepas de cobi19.
El cobi19 se ensayó mediante un simulacro de esa época en el 2020 de la que yo le hablo en septiembre de 2019 en un hotel de Nueva York
La empresa privada debe donar recursos, la conclusión del simulacro de esa época en el 2020 de la que yo le hablo de la fundación de Bill Gates - elEconomista.es
 

Contagio (Pelicula 2011):
esa época en el 2020 de la que yo le hablo de cobi19 de 2019-2020 - Wikipedia
(2:35) Transmisión del cobi19 por consumir animales infectados.
(4:00) El origen de la Epidemia sería Hong Kong (China).
(5:22) Se determina que el origen del bichito es la mezcla de material genético de bichito de Murciélago y de lechón.
(7:38) Se declara el Estado de Alarma/Ley Marcial asumiendo el ejército el control de la situación.
(9:06) En la escena final El origen del bichito es revelado: Murciélago ==> lechón ==> Humano.
(9:50) Según la versión oficial el origen de la actual esa época en el 2020 de la que yo le hablo de cobi19 en China fue por el consumo de sopa de un Murciélago infectado, después dijeron que podía ser un Pangolín o serpiente el causante de la esa época en el 2020 de la que yo le hablo.

Evento 201 Cómo fue la simulación.

Transmisión del cobi19 de
Murciélagos ==> Cerdos como la Película Contagio (2011).

El “Evento 201” simuló un brote de un nuevo cobi19 transmitido de murciélagos a cerdos, y de éstos a personas, que eventualmente se vuelve eficientemente transmisible de persona a persona, lo que deriva en una esa época en el 2020 de la que yo le hablo severa. “El patógeno y la enfermedad que causa se basan en gran medida en el SARS, pero es más transmisible en la comunidad por personas con síntomas leves”.


(1:06) Sería posible que utilizarán la Gripe Aviar como BioArma. No hace falta ya lo hacen las aves.



 
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¿Y en que beneficia esto a Trump? ¿O han sido los demócratas?
 
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Certificados digitales, tatuajes de puntos cuánticos (Tattoos quantum), iniciativa ID2020 (identidad digital, teléfonos móviles, Chips RFID).
Comienzan a enseñar sus cartas, Bil Gates anuncia que implantará microchips para combatir el el bichito-19.
¿Es más siniestro el remedio que la enfermedad? Bill Gates, el magnate de la tecnología de 64 años y actualmente la segunda persona más rica del mundo, ha revelado cuáles son sus pretensiones para combatir la esa época en el 2020 de la que yo le hablo del cobi19, el bichito-19. durante una sesión de Reddit ‘Ask Me Anything’.

Gates respondía a una pregunta sobre cómo las empresas podrían operar con las actuales restricciones impuestas por el confinamiento, cuando dijo: «Eventualmente tendremos algunos certificados digitales para mostrar quién se ha recuperado o ha sido testado recientemente o -cuando tengamos una banderilla- si la ha recibido».

Los «certificados digitales» a los que Gates se refería son los «Tattoos quantum» implantables para el hombre, en los que trabajan los investigadores del MIT y de la Universidad de Rice. Fue en diciembre de 2019 cuando científicos de las dos universidades revelaron que estaban trabajando en estos tatuajes de puntos cuánticos después de que Bill Gates les pidiera resolver el problema de la identificación de los que no han sido banderilleados.

Los tatuajes cuánticos consisten en la aplicación de microagujas solubles a base de azúcar que contienen una banderilla y «puntos cuánticos» fluorescentes a base de cobre incrustados dentro de cápsulas biocompatibles a escala de micrones. Después de que las microagujas se disuelven bajo la piel, dejan los puntos cuánticos encapsulados cuyos patrones pueden ser leídos para identificar la banderilla que fue administrada.

Es probable que los tatuajes de puntos cuánticos se complementen con otra iniciativa de Bill Gates llamada ID2020, que es un ambicioso proyecto de Microsoft para resolver el problema de más de 1.000 millones de personas que viven sin una identidad oficialmente reconocida. ID2020 está resolviendo esto a través de la identidad digital. Actualmente, la forma más factible de implementar la identidad digital es a través de teléfonos inteligentes o de implantes de microchips RFID. Este último será el enfoque probable de Gates no sólo por su viabilidad y sostenibilidad, sino también porque durante más de 6 años, la Fundación Gates ha estado financiando otro proyecto que incorpora los implantes de microchips implantables en humanos. Este proyecto, también encabezado por el MIT, es un implante de microchip anticonceptivo que permitirá a las mujeres controlar las hormonas anticonceptivas en sus cuerpos.

En cuanto a ID2020, para llevarlo a cabo, Microsoft ha formado una alianza con otras cuatro empresas, a saber: Accenture, IDEO, Gavi y la Fundación Rockefeller. El proyecto cuenta con el apoyo de las Naciones Unidas y se ha incorporado a la iniciativa de los objetivos de desarrollo sostenible de las Naciones Unidas (NT: que apoya Bergoglio).

Muchos cristianos, y sorprendentemente un número creciente de fiel a la religión del amores chiítas, se oponen a la idea del microchip y a cualquier forma de tecnología de identificación invasiva del cuerpo. Algunos legisladores y políticos cristianos en los Estados Unidos han tratado incluso de prohibir todas las formas de microchip humano.

Pero, por otro lado, esta es la oportunidad perfecta para que Bill Gates lleve a cabo los proyectos, porque a medida que el cobi19 continúa propagándose y más gente siga muriendo por la esa época en el 2020 de la que yo le hablo, el público en general estará cada vez más abierto a las tecnologías que puedan contener la propagación del bichito.

La principal razón por la que muchos cristianos y algunos fiel a la religión del amores chiítas se oponen a las tecnologías de identificación invasivas para el cuerpo, por muy útiles que sean para prevenir las pandemias, es porque creen que esas tecnologías son la llamada «Marca de Satanás» mencionada en la Biblia y en algunas profecías del Mahdi. En el Libro de las Revelaciones de la Biblia, cualquiera que no tenga esta «marca» no puede comprar o vender nada.

En noviembre del año pasado, una empresa tecnológica con sede en Dinamarca que tenía contratos para producir implantes de microchip para el Gobierno danés y la Marina de los EE.UU., tuvo que cancelar el lanzamiento de su supuestamente «revolucionario» implante de microchip, tras una agresiva campaña en internet, luego de que activistas cristianos atacaran sus oficinas en Copenhague.

ID2020 (Digital ID, Blockchain, Dinero Digital, RBU):
ID2020 | Digital Identity Alliance.
ID2020 | Alliance & Governance
Since 1913, the Rockefeller Foundation has sought to improve the well-being of humanity around the world. The Rockefeller Foundation provided ID2020 with seed funding in in 2017 and has been an ongoing supporter of ID2020’s work.
ID2020: Digital Identity with Blockchain | Accenture
Hyperledger trabajará con ID2020 para aplicar blockchain en identidad digital | CriptoNoticias
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Bill Gates anuncia la banderilla obligatoria y la implantación del chip para controlar a la sociedad
Identificación digital ID-2020, el terrorífico plan de Bill Gates para controlar a la humanidad - Periodista Digital
Bill Gates anuncia que implantará microchips para combatir el bichito-19 y rastrear las banderillas
ID2020 Blockchain al servicio de los más necesitados
La esa época en el 2020 de la que yo le hablo del cobi19 el bichito-19: El verdadero peligro es la “Agenda ID2020”
¿Qué es el infame ID2020? Es una alianza de socios público y-privados, incluyendo los organismos de las Naciones Unidas y la sociedad civil, un programa de identificación electrónica que utiliza la vacunación generalizada como plataforma para la identidad digital.

Otra hipótesis, en este momento solo una hipótesis, pero realista, es que junto con la vacunación, si no con esta, posiblemente con una posterior, se puede inyectar un nano-chip, desconocido para la persona que se está vacunando. El chip puede cargarse de forma remota con todos sus datos personales, incluidas las cuentas bancarias: dinero digital. Sí, el dinero digital es a lo que “ellos” apuntan, por lo que realmente ya no tiene control sobre su salud y otros datos íntimos, sino también sobre sus ganancias y gastos. Su dinero podría ser bloqueado o requisado, como una “sanción” por mala conducta, por nadar contra la corriente. Puedes convertirte en un simple esclavo de los amos. Comparativamente, el feudalismo puede parecer un paseo por el parque.

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ID2020 Alliance launches digital ID program with Government of Bangladesh and Gavi, announces new partners at annual su mimitos
Esto es lo que Anir Chowdhury, asesor de políticas del programa del gobierno de Bangladesh, tiene que decir:

“Estamos implementando un enfoque prospectivo de la identidad digital que brinda a las personas control sobre su propia información personal, mientras que a la vez se basa en los sistemas y programas existentes. El Gobierno de Bangladesh reconoce que el diseño de sistemas de identidad digital tiene implicaciones de largo alcance para el acceso de las personas a los servicios y medios de vida (RBU), y estamos ansiosos por ser pioneros en este enfoque “.



Evento 201 (Simulacro de esa época en el 2020 de la que yo le hablo Global).
ID2020 (Chip RFID, Datos Personales, Dinero Digital, RBU).
 
Ya nos habían avisado de todo esto.



Si alguien no ve la maniobra es que debe estar un poco ciego.


Y por qué los occidentales y no los orientales? es que el hombre solo es malo si es occidental? Son los chinos los que nos han traido esta miseria, son los chinos los que están colonizando el mundo a paladas, por qué somo tan fulastres? si se mira la historia de oriente y con China a la cabeza, han sido las sociedades más crueles del planeta y con su propia población, famosas son las torturas chinas, inconcebibles en mente humana.
 
El bichito está PATENTADO por Estados Unidos:

cobi19 isolated from humans

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STATEMENT OF GOVERNMENT SUPPORT
This invention was made by the Centers for Disease Control and Prevention, an agency of the United States Government. Therefore, the U.S. Government has certain rights in this invention.

This invention relates to a newly isolated human cobi19. More particularly, it relates to an isolated cobi19 genome, isolated cobi19 proteins, and isolated nucleic acid molecules encoding the same. The disclosure further relates to methods of detecting a severe acute respiratory syndrome-associated cobi19 and compositions comprising immunogenic cobi19 compounds.


The coronaviruses (order Nidovirales, family Coronaviridae, genus cobi19) are a diverse group of large, enveloped, positive-stranded RNA viruses that cause respiratory and enteric diseases in humans and other animals. At approximately 30,000 nucleotides (nt), their genome is the largest found in any of the RNA viruses. Coronaviruses are spherical, 100–160 nm in diameter with 20–40 nm complex club shaped surface projections surrounding the periphery. Coronaviruses share common structural proteins including a spike protein (S), membrane protein (M), envelope protein (E), and, in a subset of coronaviruses, a hemagglutinin-esterase protein (HE). The S protein, a glycoprotein which protrudes from the bichito membrane, is involved in host cell receptor binding and is a target for neutralizing antibodies. The E and M proteins are involved in virion formation and release from the host cell. cobi19 particles are found within the cisternae of the rough endoplasmic reticulum and in vesicles of infected host cells where virions are assembled. The cobi19 genome consists of two open reading frames (ORF1a and ORF1b) yielding an RNA polymerase and a nested set of subgenomic mRNAs encoding structural and nonstructural proteins, including the S, E, M, and nucleocapsid (N) proteins. The genus cobi19 includes at least 13 species which have been subdivided into at least three groups (groups I, II, and III) on the basis of serological and genetic properties (deVries et al., Sem. Virol. 8:33–47, 1997; Fields et al. eds. Fields Virology, 3rd edition, Raven Press, Philadelphia, 1323–1341, 1996; Mahey and Collier eds. Microbiology and Microbial Infections, Volume 1 Virology, 9th edition, Oxford University Press, 463–479, 1998).

The three known groups of cobi19 are associated with a variety of diseases of humans and domestic animals (for example, cattle, pigs, cats, dogs, rodents, and birds), including gastroenteritis and upper and lower respiratory tract disease. Known coronaviruses include human cobi19 229E (HCoV-229E), canine cobi19 (CCoV), feline infectious peritonitis bichito (FIPV), porcine transmissible gastroenteritis bichito (TGEV), porcine epidemic diarrhea bichito (PEDV), human cobi19 OC43 (HcoV-OC43), bovine cobi19 (BCoV), porcine hemagglutinating encephalomyelitis bichito (HEV), rat sialodacryoadenitis bichito (SDAV), mouse hepatitis bichito (MHV), turkey cobi19 (TCoV), and avian infectious bronchitis bichito (IBV-Avian) (Fields et al. eds. Fields Virology, 3rd edition, Raven Press, Philadelphia, 1323–1341, 1996; Mahey and Collier eds. Microbiology and Microbial Infections, Volume 1 Virology, 9th edition, Oxford University Press, 463–479, 1998).

cobi19 infections are generally host specific with respect to infectivity and clinical symptoms. Coronaviruses further exhibit marked tissue tropism; infection in the incorrect host species or tissue type may result in an abortive infection, mutant bichito production and altered virulence. Coronaviruses generally do not grow well in cell culture, and animal models for human cobi19 infection are lacking. Therefore, little is known about them (Fields et al. eds. Fields Virology, 3rd edition, Raven Press, Philadelphia, 1323–1341, 1996). The known human coronaviruses are notably fastidious in cell culture, preferring select cell lines, organ culture, or suckling mice for propagation. Coronaviruses grown in cell culture exhibit varying degrees of virulence and/or cytopathic effect (CPE) depending on the host cell type and culture conditions. The only human or animal cobi19 which has been shown to grow in Vero E6 cells is PEDV, and it requires the addition of trypsin to culture medium for growth in Vero E6 cells. Moreover, PEDV adapted to Vero E6 cell culture results in a strikingly different CPE, with cytoplasmic vacuoles and the formation of large syncytia (Hofmann and Wyler, J. Clin. Micro. 26:2235–39, 1988; Kusanagi et el., J. Vet. Med. Sci. 554:313–18, 1991).

cobi19 have not previously been known to cause severe disease in humans, but have been identified as a major cause of upper respiratory tract illness, including the common cold. Repeat infections in humans are common within and across serotype, suggesting that immune response to cobi19 infection in humans is either incomplete or short lived. cobi19 infection in animals can cause severe enteric or respiratory disease. Vaccination has been used successfully to prevent and control some cobi19 infections in animals. The ability of animal-specific coronaviruses to cause severe disease raises the possibility that cobi19 could also cause more severe disease in humans (Fields et al. eds. Fields Virology, 3rd edition, Raven Press, Philadelphia, 1323–1341, 1996; Mahey and Collier eds. Microbiology and Microbial Infections, Volume 1 Virology, 9th edition, Oxford University Press, 463–479, 1998).

In late 2002, cases of life-threatening respiratory disease with no identifiable etiology were reported from Guangdong Province, China, amowed by reports from Vietnam, Canada, and Hong Kong of severe febrile respiratory illness that spread to household members and health care workers. The syndrome was designated “severe acute respiratory syndrome” (SARS) in February 2003 by the Centers for Disease Control and Prevention (MMWR, 52:241–48, 2003).

Past efforts to develop rapid diagnostics and vaccines for cobi19 infection in humans have been hampered by a lack of appropriate research models and the moderate course of disease in humans. Therefore, a need for rapid diagnostic tests and vaccines exists.

SUMMARY OF THE DISCLOSURE
A newly isolated human cobi19 has been identified as the causative agent of SARS, and is termed SARS-CoV. The nucleic acid sequence of the SARS-CoV genome and the amino acid sequences of the SARS-CoV open reading frames are provided herein.

This disclosure provides methods and compositions useful in detecting the presence of a SARS-CoV nucleic acid in a sample and/or diagnosing a SARS-CoV infection in a subject. Also provided are methods and compositions useful in detecting the presence of a SARS-CoV antigen or antibody in a sample and/or diagnosing a SARS-CoV infection in a subject.

The foregoing and other antiestéticatures and advantages will become more apparent from the amowing detailed description of several embodiments, which proceeds with reference to the accompanying figures.

BRIEF DESCRIPTION OF THE FIGURES
FIGS. 1A–B are photomicrographs illustrating typical early cytopathic effects seen with cobi19 isolates and serum from SARS patients. FIG. 1A is a photomicrograph of Vero E6 cells inoculated with an oropharyngeal specimen from a SARS patient (×40). FIG. 1B is a photomicrograph of infected Vero E6 cells reacting with the serum of a convalescent SARS patient in an indirect fluorescent antibody (IFA) assay (×400).

FIGS. 2A–B are electronmicrographs illustrating ultrastructural characteristics of the SARS-associated cobi19 (SARS-CoV). FIG. 2A is a thin-section electron-microscopical view of viral nucleocapsids aligned along the membrane of the rough endoplasmic reticulum (arrow) as particles bud into the cisternae. Enveloped virions have surface projections (arrowhead) and an electron-lucent center. Directly under the viral envelope lies a characteristic ring formed by the helical nucleocapsid, often seen in cross-section. FIG. 2B is a negative stain (methylamine tungstate) electronmicrograph showing stain-penetrated cobi19 particle with the typical internal helical nucleocapsid-like structure and club-shaped surface projections surrounding the periphery of the particle. Bars: 100 nm.

FIG. 3 is an estimated maximum parsimony tree illustrating frutative phylogenetic relationships between SARS-CoV and other human and animal coronaviruses. Phylogenetic relationships are based on sequence alignment of 405 nucleotides of the cobi19 polymerase gene ORF1b (nucleic acid 15,173 to 15,578 of SEQ ID NO: 1). The three major cobi19 antigenic groups (I, II and III), represented by HcoV-229E, CCoV, FIPV, TGEV, PEDV, HcoV-OC43, BCoV, HEV, SDAV, MHV, TCoV, and IBV-Avian, are shown shaded. Bootstrap values (100 replicates) obtained from a 50% majority rule consensus tree are plotted at the main internal branches of the phylogram. Branch lengths are proportionate to nucleotide differences.

FIG. 4 is a pictorial representation of neighbor joining trees illustrating frutative phylogenetic relationships between SARS-CoV and other human and animal coronaviruses. Amino acid sequences of the indicated SARS-CoV proteins were compared with those from reference viruses representing each species in the three groups of coronaviruses for which complete genomic sequence information was available [group 1: HCoV-229E (AF304460); PEDV (AF353511); TGEV (AJ271965); group 2: BCoV (AF220295); MHV (AF201929); group 3: infectious bronchitis bichito (M95169)]. Sequences for representative strains of other cobi19 species, for which partial sequence information was available, were included for some of the structural protein comparisons [group 1: CCoV (D13096); FCoV (AY204704); porcine respiratory cobi19 (Z24675); group 2: HCoV-OC43 (M76373, L14643, M93390); HEV (AY078417); rat cobi19 (AF207551)]. Sequence alignments and neighbor-joining trees were generated by using Clustalx 1.83 with the Gonnet protein comparison matrix. The resulting trees were adjusted for final output using treetool 2.0.1.

FIGS. 5A–C are photomicrographs illustrating diffuse alveolar damage in a patient with SARS (FIGS. 5A–B), and immunohistochemical staining of SARS-CoV-infected Vero E6 cells (FIG. 5C). FIG. 5A is a photomicrograph of lung tissue from a SARS patient (×50). Diffuse alveolar damage, abundant foamy macrophages and multinucleated syncytial cells are present; hematoxylin and eosin stain was used. FIG. 5B is a higher magnification photomicrograph of lung tissue from the same SARS patient (×250). Syncytial cells show no conspicuous viral inclusions. FIG. 5C is a photomicrograph of immunohistochemically stained SARS-CoV-infected cells (×250). Membranous and cytoplasmic immunostaining of individual and syncytial Vero E6 cells was achieved using feline anti-FIPV-1 ascitic fluid. Immunoalkaline phosphatase with naphthol-fast red substrate and hematoxylin counter stain was used.

FIG. 6A–B are electronmicrographs illustrating ultrastructural characteristics of a cobi19-infected cell in bronchoalveolar lavage (BAL) from a SARS patient. FIG. 6A is an electronmicrograph of a cobi19-infected cell. Numerous intracellular and extracellular particles are present; virions are indicated by the arrowheads. FIG. 6B is a higher magnification electronmicrograph of the area seen at the arrow in FIG. 6A (rotated clockwise approximately 90°). Bars: FIG. 6A, 1 μm; FIG. 6B, 100 nm.

FIGS. 7A–C illustrate the organization of the SARS-CoV genome. FIG. 7A is a diagram of the overall organization of the 29,727-nt SARS-CoV genomic RNA. The 72-nt leader sequence is represented as a small rectangle at the left-most end. ORFs1a and 1b, encoding the nonstructural polyproteins, and those ORFs encoding the S, E, M, and N structural proteins, are indicated. Vertical position of the boxes indicates the phase of the reading frame (phase 1 for proteins above the line, phase two for proteins on the line and phase three for proteins below the line). FIG. 7B is an expanded view of the structural protein encoding region and predicted mRNA transcripts. Known structural protein encoding regions (dark grey boxes) and regions and reading frames for potential products X1–X5 (light gray boxes) are indicated. Lengths and map locations of the 3′-coterminal mRNAs expressed by the SARS-CoV are indicated, as predicted by identification of conserved transcriptional regulatory sequences. FIG. 7C is a digitized image of a nylon membrane showing Northern blot analysis of SARS-CoV mRNAs. Poly(A)+ RNA from infected Vero E6 cells was separated on a formaldehyde-agarose gel, transferred to a nylon membrane, and hybridized with a digoxigenin-labeled riboprobe overlapping the 3′-untranslated region. Signals were visualized by chemiluminescence. Sizes of the SARS-CoV mRNAs were calculated by extrapolation from a log-linear fit of the molecular mass marker. Lane 1, SARS-CoV mRNA; lane 2, Vero E6 cell mRNA; lane 3, molecular mass marker, sizes in kB.

SEQUENCE LISTING
The nucleic and amino acid sequences listed in the accompanying sequence listing are shown using standard letter abbreviations for nucleotide bases, and three letter code for amino acids, as defined in 37 C.F.R. 1.822. Only one strand of each nucleic acid sequence is shown, but the complementary strand is understood as included by any reference to the displayed strand. In the accompanying sequence listing:

SEQ ID NO: 1 shows the nucleic acid sequence of the SARS-CoV genome.

SEQ ID NO: 2 shows the amino acid sequence of the SARS-CoV polyprotein 1a (encoded by nucleic acid 265 to nucleic acid 13,398 of SEQ ID NO: 1).

SEQ ID NO: 3 shows the amino acid sequence of the SARS-CoV polyprotein 1b (encoded by nucleic acid 13,398 to 21,482 of SEQ ID NO: 1).

SEQ ID NO: 4 shows the amino acid sequence of the SARS-CoV S protein (encoded by nucleic acid 21,492 to 25,256 of SEQ ID NO: 1).

SEQ ID NO: 5 shows the amino acid sequence of the SARS-CoV X1 protein (encoded by nucleic acid 25,268 to 26,089 of SEQ ID NO: 1).

SEQ ID NO: 6 shows the amino acid sequence of the SARS-CoV X2 protein (encoded by nucleic acid 25,689 to 26,150 of SEQ ID NO: 1).

SEQ ID NO: 7 shows the amino acid sequence of the SARS-CoV E protein (encoded by nucleic acid 26,117 to 26,344 of SEQ ID NO: 1).

SEQ ID NO: 8 shows the amino acid sequence of the SARS-CoV M protein (encoded by nucleic acid 26,398 to 27,060 of SEQ ID NO: 1).

SEQ ID NO: 9 shows the amino acid sequence of the SARS-CoV X3 protein (encoded by nucleic acid 27,074 to 27,262 of SEQ ID NO: 1).

SEQ ID NO: 10 shows the amino acid sequence of the SARS-CoV X4 protein (encoded by nucleic acid 27,273 to 27,638 of SEQ ID NO: 1).

SEQ ID NO: 11 shows the amino acid sequence of the SARS-CoV X5 protein (encoded by nucleic acid 27,864 to 28,115 of SEQ ID NO: 1).

SEQ ID NO: 12 shows the amino acid sequence of the SARS-CoV N protein (encoded by nucleic acid 28,120 to 29,385 of SEQ ID NO: 1).

SEQ ID NOs: 13–15 show the nucleic acid sequence of several SARS-CoV-specific oligonucleotide primers.

SEQ ID NOs: 16–33 show the nucleic acid sequence of several oligonucleotide primers/probes used for real-time reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) SARS-CoV assays.

SEQ ID NOs: 34–35 show the nucleic acid sequence of two degenerate primers designed to anneal to sites encoding conserved cobi19 amino acid motifs.

SEQ ID NOs: 36–38 show the nucleic acid sequence of several oligonucleotide primers/probe used as controls in real-time RT-PCR assays.

DETAILED DESCRIPTION OF SEVERAL EMBODIMENTS
I. Abbreviations

M: cobi19 membrane protein N: cobi19 nucleoprotein ORF: open reading frame PCR polymerase chain reaction RACE: 5′ rapid amplification of cDNA ends RT-PCR: reverse transcription-polymerase chain reaction S: cobi19 spike protein SARS: severe acute respiratory syndrome SARS-CoV: severe acute respiratory syndrome-associated cobi19 TRS: transcriptional regulatory sequence


https://patents.google.com/patent/US7220852B1/en?oq=US7220852B1

Realmente no se patenta el bichito sino una secuencia de RNA que corresponde al bichito. En una patente lo que cuenta es las "Claims"

Claims
1. An isolated nucleic acid molecule consisting of the nucleotide sequence as set forth in SEQ ID NO: 1.

Intentan tener derechos sobre cualquier método que use la secuencia de RNA del bichito para detectarlo.
 
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